我司在科研實(shí)驗(yàn)過(guò)種中一些基本的操作：
收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。
洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）
標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成400ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，*管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在*管中加入400ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。
檢測(cè)程序
加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。
洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。每孔中加入*抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。
洗板：同前。每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。
洗板：同前。每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。每孔加入100ul終止液混勻。30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。
結(jié)果計(jì)算與判斷
1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。
2.以標(biāo)準(zhǔn)品40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0 ng/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IGF-1R含量。
試劑盒性能
1.靈敏度：zui小的IGF-1R 檢測(cè)濃度小于0.3ng/ml。
2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人IGF-1R。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。
3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10％。
注意事項(xiàng)
1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。
3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。
4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。
5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！
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